ПЦР соскоб

Содержание

Анализы тканей шейки матки: когда актуальны и о чем могут рассказать результаты?

Женское здоровье очень хрупкое, оно требует регулярного контроля. Особое внимание стоит уделять состоянию шейки матки. Именно потому врачи нередко направляют пациенток на анализ тканей шейки матки даже в профилактических целях. В каких случаях обычно назначается это исследование и как оно проходит?

Когда и зачем врач направляет на анализ соскоба шейки матки

Многие заболевания шейки матки долго протекают практически бессимптомно. Для того чтобы их вовремя выявить, необходимо исследовать пробу биоматериала. Чаще всего для анализа берут мазок или очень маленький кусочек ткани. Направление на анализ может дать онколог или гинеколог, в некоторых случаях — венеролог.

Анализ тканей шейки матки позволяет выявить онкологические заболевания, его также назначают при подозрении на наличие вируса папилломы человека, эрозии шейки матки. Такие исследования могут быть не только диагностическими — врач может направить пациентку на анализ шейки матки и для того, чтобы проследить изменения во время лечения заболевания, и при необходимости скорректировать терапию.

Примите к сведению
Рак шейки матки — одно из самых распространенных онкологических заболеваний у женщин: ежегодно выявляется около 10 случаев на 100 тысяч пациенток. От стадии рака на момент выявления зависит прогноз выживаемости.

Цитологический анализ соскоба шейки матки

Такой анализ мазка шейки матки (исследование строения, структур клетки и сравнение их с нормальными) — самый точный и при этом простой для пациентки метод исследования. Он дает возможность обнаружить видоизмененные клетки, в том числе пораженные злокачественными процессами, его также применяют для диагностики дисплазии и выявления наличия вируса папилломы человека.

Рекомендуется проходить это исследование регулярно. В молодом возрасте — раз в три года, а после 50 — раз в пять лет, но лучше — ежегодно.

Опасаться этой процедуры не стоит — она простая и безболезненная. Забор материала проходит во время гинекологического осмотра. Анализ можно сдавать в любой период цикла, кроме менструации и трех дней после ее окончания. Сначала врач очищает ватным тампоном шейку матки от выделений, а затем специальной щеточкой берет пробу материала и помещает ее на предметное стекло, которое отправляется в лабораторию.

Существует несколько методов исследования полученного материала.

  • Самый распространенный — метод окрашивания клеток по Папаниколау (РАР-тест), позволяющий выявить клеточные изменения на ранних стадиях. Это недорогой тест, который уже давно и успешно применяется для выявления патологических изменений в клетках шейки матки.
  • Цитологическое исследование соскобов шейки матки и цервикального канала с описанием по терминологической системе Бетесда , в основе которого лежит определение изменений патологического характера в клеточном ядре, дает максимум информации и позволяет вовремя выявить дисплазию и онкологические заболевания.
  • Жидкостное исследование NovaPrep является одним из наиболее современных и точных.

Чтобы результаты анализа шейки матки были точны, нужно соблюдать простые правила подготовки:

  • Воздержаться от половых контактов в течение двух дней перед анализом.
  • На тот же срок следует отказаться от любых антибактериальных и противовирусных препаратов.
  • Также не рекомендуется использовать средства для интимной гигиены, противозачаточные и лечебные вагинальные мази, свечи, шарики, гели и губки.
  • В день исследование не стоит проводить спринцевание.

После взятия мазка врачи не советуют вступать в половые контакты еще 1–2 недели, рекомендуется также не пользоваться тампонами и проводить спринцевания.

Результат обозначается как CIN 1, 2 или 3 — то есть дисплазия первой, второй или третьей степени тяжести. Carcinoma означает выявление карциномы. Если в результате анализа стоит обозначение CIN, это почти всегда означает наличие вируса папилломы человека, наиболее частого виновника развития дисплазии шейки матки.

Гистологический анализ биопсийных тканей шейки матки

Иногда данных, полученных после анализа мазка шейки матки, недостаточно. Тогда назначается биопсия. Биопсия — это извлечение маленького фрагмента ткани шейки матки для проведения микроскопического исследования. Как и цитологический анализ, это исследование может быть лечебным и диагностическим. Биопсия шейки матки — это более точный метод, чем цитологический.

Существует несколько способов изъятия фрагмента ткани шейки матки.

Чаще всего используют малотравматичный щипковый метод, когда образец отщипывается специальными щипчиками для биопсии.

  • Радиоволновой метод предполагает применение радиоволновой петли, его преимущество — бескровность, хотя иногда в течение нескольких дней после процедуры могут наблюдаться выделения из влагалища.
  • Конизация — отсечение конусообразного фрагмента ткани — применяется как для забора материала, так и для удаления пораженного участка. Выбор способа зависит от целей исследования.

Условия и правила подготовки к биопсии шейки матки мало отличаются от условия взятия мазка. Однако, в отличие от забора мазка, эта манипуляция проводится под анестезией. Поэтому отправляться к врачу следует натощак, последний прием пищи должен состояться за 10–12 часов до анализа.

Иногда после биопсии пациентки жалуются на тянущую боль в нижней части живота и мажущие выделения. Чтобы восстановление прошло как можно скорее, а все неприятные ощущения быстро прошли, в течение 1,5–2 месяцев после биопсии нужно соблюдать следующие рекомендации:

  • Не посещать баню или сауну, не принимать ванну (разрешен только душ).
  • Исключить значительные физические нагрузки.
  • Не пользоваться тампонами, вагинальными мазями и свечами, не проводить спринцевания.
  • Не вступать в половые контакты.
  • С осторожностью принимать препараты, разжижающие кровь, в том числе и аспирин.

Результаты анализов биопсии шейки матки будут готовы примерно через 12 дней. Как правило, они очень точны и позволяют со всей определенностью сказать, есть патологическое изменение в тканях или нет.

Результаты исследования обозначаются следующим образом:

  • Норма.
  • Незначительные изменения.
  • Инфекционное заболевание, воспаление.
  • Цервикальная дисплазия 1 степени.
  • Цервикальная дисплазия 2 степени.
  • Цервикальная дисплазия 3 степени.
  • Койлоцитоз (вирус папилломы человека).
  • Инвазивный рак.

Лабораторные методы являются важнейшим этапом диагностики заболеваний шейки матки. Так, клинический осмотр гинекологом в 80% случаев не позволяет идентифицировать 1а стадию рака шейки матки, а значит — принять превентивные меры и повысить вероятность благоприятного исхода. Это еще раз доказывает необходимость сдачи биоматериала на цитологические и гистологические исследования даже при малейших подозрениях на патологию и в профилактических целях.

ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции

12243 24 Апр

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

В конце статьи см. словарь
Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году Кэри Мюллис (американский учёный). Впоследствии он получил за это изобретение Нобелевскую премию. В настоящее время ПЦР-диагностика является, одним из самых точных и чувствительных методов диагностики инфекционных заболеваний.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе).
В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для визуальной детекции. При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце.
Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.
Специфичность и применение
ПЦР — метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.
ПЦР позволяет диагностировать наличие долго растущих возбудителей, не прибегая к трудоёмким микробиологическим методам, что особенно актуально в гинекологии и урологии при диагностике урогенитальных инфекций, передающихся половым путем (ИППП).
Также, этим методом проводят диагностику вирусных инфекций, таких как гепатиты, ВИЧ и др. Чувствительность метода значительно превосходит таковую у иммунохомических и микробиологических методов, а принцип метода позволяет диагностировать наличие инфекций со значительной антигенной изменчивостью.
Специфичность ПЦР при использовании технологии PCR даже для всех вирусных, хламидийных, микоплазменных, уреаплазменных и большинства других бактериальных инфекций достигает 100%. Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР-диагностика обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно.
Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и скрыто существующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях.
Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов. Методом ПЦР возможно выявление возбудителей не только в клиническом материале, полученном от больного, но и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва и т. д.). В урологической и гинекологической практике — для выявления хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса, гарднереллёза, микоплазменной инфекции, ВПЧ — вирусов папилломы человека; в пульмонологии — для дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных пневмоний, туберкулёза; в гастроэнтерологии — для выявления хеликобактериоза; в клинике инфекционных заболеваний — в качестве экспресс-метода диагностики сальмонеллёза, дифтерии, вирусных гепатитов В, С и G; в гематологии — для выявления цитомегаловирусной инфекции, онковирусов.
Специфичность ПЦР основана на образовании комплементарных комплексов между матрицей и праймерами — короткими синтетическими олигонуклеотидами длиной 18 — 30 букв. Каждый из праймеров сопоставим (комплементарен) с одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка.
После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.
Проведение ПЦР
Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

  • ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
  • два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
  • термостабильная ДНК-полимераза;
  • дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T);
  • ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
  • буферный раствор.

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1°C. Чтобы избежать испарения реакционной смеси, в пробирку добавляют высококипящее масло, например, вазелиновое. Добавление специфичеких ферментов может увеличить выход ПЦР-реакции.
Ход реакции
Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 — 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий. Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 — 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 — 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись. Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 — 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.
Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 — 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 — 2 минут.
ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 — 15 мин.
Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию
Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой — позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.
Словарь
ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота — биологический полимер, один из двух типов нуклеиновых кислот, обеспечивающих хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов. Основная роль ДНК в клетках — долговременное хранение информации о структуре РНК и белков.
РНК– рибонуклеиновая кислота — биологический полимер, близкий по своему химическому строению к ДНК. Молекула РНК построена из тех же мономерных звеньев — нуклеотидов, что и ДНК. В природе РНК, как правило, существует в виде одиночной цепочки. У некоторых вирусов РНК является носителем генетической информации. В клетке играет важную роль при передаче информации от ДНК к белку. РНК синтезируется на ДНК-матрице. Процесс этот называется транскрипцией. В ДНК имеются участки, где содержится информация, ответственная за синтез трех видов РНК, различающихся по выполняемым функциям: информационной или матричной РНК (мРНК), рибосомальной (рРНК) и транспортной (тРНК). Все три вида РНК тем или иным способом участвуют в синтезе белка. Однако информация по синтезу белка содержится только в мРНК.
Нуклеоти́ды — основная повторяющаяся единица в молекулах нуклеиновых кислот, продукт химического соединения азотистого основания, пятиуглеродного сахара (пентозы) и одной или нескольких фосфатных групп. Нуклеотиды, представленные в нуклеиновых кислотах, содержат одну фосфатную группу. Они называются по содержащемуся в них азотистому основанию — адениновый (A), содержащий аденин, гуаниновый (G) — гуанин, цитозиновый (C) — цитозин, тиминовый (Т) — тимин, урациловый (U) — урацил. В состав ДНК входят 4 типа нуклеотидов — A, T, G, C, в состав РНК также 4 типа — A, U, G, C. Сахаром в составе всех нуклеотидов ДНК является дезоксирибоза, РНК — рибоза. При образовании нуклеиновых кислот нуклеотиды, связываясь, образуют сахаро-фосфатный остов молекулы, по одну сторону которого находятся основания.
Праймер – котроткая ДНК, используемая для репликации матричной цепи. Каждый из праймеров комплементарен одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка.
Литература

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Взятие гинекологического мазка с последующим исследованием его с помощью ПЦР открывает возможности для диагностики инфекций, передаваемых половых путём. Открыто данное исследование было в 80-х годах 20 века. Ученый, разработавший его, получил Нобелевское вознаграждение. Открытие позволяет узнавать возбудителя заболеваний при его минимальной концентрации в половых путях. Высокая точность инновационной ПЦР-диагностики делает её незаменимым исследованием во многих сложных клинических случаях.

Методика исследования

Суть метода полимеразной цепной реакции заключается в размножении участка ДНК. Порой для возникновения симптомов определённых заболеваний необходима мизерная концентрация бактерий или вирусов. Большинство микробиологических исследований не могут обнаружить патогенные организмы в таком разведении, а тем более их с точностью подсчитать. В таких случаях только и выручает метод активного полимеразного наращивания.

ПЦР-диагностика требует для исследования участок ДНК, который подвергается клонированию. К биологическому материалу добавляют различные реагенты, которые комплиментарно достраиваются к участкам выделенного генетического материала. Многократное преумножение ДНК позволяет определить не только род, но и вид бактериологического или вирусного материала. Уточнение вида возбудителя делает лечение максимально эффективным и этиотропным.

Мазки ПЦР в гинекологии позволяют выделить возбудителей хламидиоза, гонореи, микоплазмоза, уреаплазмоза и многих других опасных инфекций. Часто эти заболевания долго существуют в скрытых, латентных формах и долго не проявляются клиническими симптомами. ПЦР позволяет выявить их на ранних стадиях и наиболее своевременно начать лечение.

Среди явных преимуществ полимеразной реакции выделены:

  1. Высокая точность определения природы патогенного микроорганизма.
  2. Возможность выделения вируса или бактерии при мизерных их концентрациях в биологическом материале.
  3. Анализы проводятся достаточно быстро.
  4. Заражение некоторыми микроорганизмами можно выявить только с помощью ПЦР. Вирус иммунодефицита также возможно выделить иди подтвердить с помощью данного диагностического мероприятия.

Исследование в гинекологии

В гинекологической практике мазок на ПЦР используется довольно широко. Ведь он позволяет выявить возбудителей большинства воспалительных заболеваний женских половых органов наружной и внутренней локализации. Анализ проводят женщинам, активно живущим половой жизнью, беременным пациенткам и проходящим прегравидарную подготовку.

  • Мазок ПЦР на ИППП нередко выявляет не только опасные бактериальные инфекции, но и заражение вирусами герпеса или папилломы человека. Последние и вовсе являются онкогенными провокаторами, излюбленным местом которых является ткань шейки матки.
  • ПЦР помогает выявить хламидии у беременных женщин, которые не обследовались на данную инфекцию до зачатия. Бактерия может вызывать различные уродства и пороки развития плода, а также вовсе прекращать его развитие. Носительство хламидий может долгое время не проявляться, быть выявлено лишь во время беременности как причина внутриутробной гибели зародыша. Но и при своевременном обнаружении бактерий у женщин «в положении» предоставляется возможным провести лечение без урона для матери и плода.

Является ошибочным мнение, что взятие мазков ПЦР на ИППП при беременности создает угрозу выкидыша. Соскоб для исследования действительно берут из шейки матки, но таким образом, что не затрагивают растущий эмбрион. К тому же, данная анатомическая область по длине составляет около 4 см вне беременности и несколько уменьшается на поздних сроках гестации. Это позволяет достаточно безопасно взять материал для исследования.

Увеличивают достоверность анализа некоторые простые правила, которые следует соблюдать женщинам перед исследованием:

  1. Пациенткам рекомендуется не мочиться 2-3 часа до выполнения соскоба из шейки матки.
  2. За день до взятия материала необходимо отменить прием антибактериальных и бактериостатических средств.
  3. Вне беременности лучше сдавать мазок в середине менструального цикла. Неблагоприятным периодом считается время до начала менструального кровотечения или сразу после него.
  4. 2-3 дня не рекомендуется использовать локальные средства контрацепции или любые другие вагинальные медикаменты.
  5. Сутки до исследования нельзя иметь половые отношения.
  6. Накануне взятия пробы запрещается принимать душ и обмывать наружные половые органы.
  7. Нельзя брать соскоб из шейки матки в тот же день, когда проводилось кольпоскопическое исследование.

Довольно простые рекомендации позволят наиболее точно определить заболевание, передающееся половым путем, по генетическому материалу его возбудителя.

Показания для ПЦР

Полимеразная реакция как метод диагностики представляет собой новый и инновационный способ идентификации микроорганизмов. К его помощи активно прибегают в следующих случаях:

  1. При установлении причин бесплодия. Невозможность зачать ребенка часто связана с инфекцией половых органов, которую тяжело распознать обычными способами. Латентное течение многих инфекций определяет склонность к прерыванию беременности, несостоятельности имплантации плодного яйца.
  2. При установленной природе инфекционного возбудителя ПЦР проводится для выяснения фазы заболевания: острой или хронической.
  3. Мазки ПЦР у женщин берут в случае тяжело протекающих беременностей. Внутриутробные инфекции, приобретенные до беременности и в ее активное течение, вызывают задержку развития и гибель плода. Рождение детей с аномалиями развития заставляет обследовать мать повторно в послеродовом периоде.
  4. В ходе диагностической процедуры возможно установить также чувствительность и устойчивость микроорганизмов к антибиотикам.

Несмотря на кажущуюся сложность, проведение полимеразной реакции продолжатся не более 4 дней. Это время необходимо для построения полноценной молекулы ДНК, которую удается идентифицировать с конкретным микроорганизмом. Взятие биологического материала как субстрата для анализа и вовсе занимает до 5 минут.

Результат ПЦР-метода имеет два варианта интерпретации: позитивный либо негативный:

  • Положительный ответ полимеразной реакции подтверждает наличие в материале микробных следов, а также указывает род и вид возбудителя.
  • Отрицательный результат говорит о стерильности биологического материала, отсутствии бактерий и вирусных частиц.

На основе расшифровки мазка врач определяется с методикой лечения. Этиотропные антибиотикотерапия или противовирусное лечение позволяют быстро и бесследно очистить микрофлору от возбудителя опасных инфекций. Своевременная диагностика не позволяет навредить и растущему плоду во время беременности матери – при проведении терапевтических курсов эрадикации возбудителей инфекций, передающихся половым путем.

ПЦР анализ

  • О методе ПЦР
  • Цены на ПЦР диагностику

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – на сегодняшний день самый быстрый и достоверный метод диагностики инфекционных заболеваний.

Принцип метода полимеразной цепной реакции был разработан Кэри Мюлисом (Kary Mullis) в 1983 г. За свое открытие К. Мюллис в 1993 г получил Нобелевскую премию по химии.

Метод ПЦР позволяет добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). Метод основан на многократном избирательном копировании (амплификации) определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях.

Преимущества метода ПЦР диагностики как метода диагностики инфекционных заболеваний

Прямое определение наличия возбудителей

Многие традиционные методы диагностики, например иммуноферментный анализ, выявляют белки-маркеры, являющиеся продуктами жизнедеятельности инфекционных агентов, что дает лишь опосредованное свидетельство наличия инфекции. Выявление специфического участка ДНК возбудителя методом ПЦР дает прямое указание на присутствие возбудителя инфекции.

Высокая специфичность

Высокая специфичность метода ПЦР обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется уникальный, характерный только для данного возбудителя фрагмент ДНК. Специфичность задается нуклеотидной последовательностью праймеров, что исключает возможность получения ложных результатов, в отличие от иммунологических методов анализа, где нередки ошибки в связи с перекрестно-реагирующими антигенами.

Высокая чувствительность

Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР анализ обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Чувствительность ПЦР анализа составляет 10-100 клеток в пробе (чувствительность иммунологических и микроскопических тестов — 103-105 клеток).

Универсальность процедуры выявления различных возбудителей

Материалом для исследования методом ПЦР служит ДНК возбудителя. Метод основан на выявлении фрагмента ДНК или РНК, являющегося специфичным для конкретного организма. Сходство химического состава всех нуклеиновых кислот позволяет применять унифицированные методы проведения лабораторных исследований. Это дает возможность диагностировать несколько возбудителей из одной биопробы.

Высокая скорость получения результата анализа

Для проведения ПЦР анализа не требуется выделение и выращивание культуры возбудителя, что занимает большое количество времени. Унифицированный метод обработки биоматериала и детекции продуктов реакции и автоматизация процесса амплификации дают возможность провести полный анализ за 4-5 часов.

Возможность диагностики не только острых, но и латентных инфекций

Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и персистирующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях. Применение ПЦР диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов.

Материалом для осуществления ПЦР-диагностики могут служить

  • Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. Обычно используются для диагностики заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), таких как гонорея, хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез, герпетическая и другие инфекции, поражающие слизистые оболочки.
  • Моча. Моча может использоваться при инфекционном поражении мочеполового тракта у мужчин и мочевыделительных органов у женщин (у мужчин использование в качестве материала мочи заменяет эпителиальный соскоб).
  • Мокрота. Мокрота используется для диагностики туберкулеза и реже для диагностики респираторных форм хламидиоза и микоплазмоза. Мокроту в количестве 15-20 мл собирают в стерильный (одноразовый) флакон.
  • Кровь, плазма, сыворотка. Используются для ПЦР анализа вирусов гепатитов B, C, D, G, герпеса, ЦМВ, ВИЧ, исследования генов человека.
  • Биологические жидкости. Сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, слюна забираются по показаниям.
  • Биоптаты. Чаще всего используют биоптаты желудка и двенадцатиперстной кишки для выявления хеликобактерной инфекции.

Стоимость ПЦР анализа в нашем медцентре

Подготовка к анализу и сдача мазка на ПЦР

Об анализе ПЦР

Метод ПЦР по праву считается высокоточным и эффективным способом диагностики, позволяющим выявить и идентифицировать различные вирусные/инфекционные и наследственные болезни. Данный способ диагностики отличается тем, что дает возможность определить инфекционную или вирусную патологию не только в острой либо хронической стадии, но в инкубационный период, то есть в промежуток времени от момента заражения до появления первых клинических признаков.

Также характерной особенностью метода ПЦР является его специфичность, что исключает получение ложноположительного результата. С помощью ПЦР определяется не только ДНК или РНК, принадлежащей тому либо другому микроорганизму или вирусу, но и их концентрация в исследуемом биоматериале. Таким образом, метод ПЦР осуществляет качественный и количественный анализ ДНК/РНК.

Суть метода ПЦР заключается в обработке биоматериала специальными реактивами, что позволяет выявить чужеродную ДНК. Многократное повышение концентрации ДНК/РНК добиваются с помощью ферментов, добавленных при исследовании биоматериала.

Для исследования используются различные жидкости и эпителий человеческого организма. Это может быть кровь, плазма, моча, сперма, сок предстательной железы, вагинальные выделения, соскоб из половых путей и уретры и прочее.

Достоинства диагностики с помощью ПЦР

Положительными моментами метода ПЦР считаются:

  • выявление и идентификация инфекционного возбудителя (даже при отсутствии клинических и других лабораторных данных);
  • одновременное обнаружение нескольких возбудителей инфекции при использовании одного биологического образца;
  • высокая чувствительность метода, исключающая перекрестные реакции;
  • исключение получения ложноположительных реакций.

Какие инфекции выявляют методом ПЦР

С помощью метода ПЦР возможно определить в организме человека следующие инфекции:

  • вирус гепатита (А, В, С, на А ни В, Д);
  • цитомегаловирус;
  • вирус герпеса;
  • ВИЧ;
  • энтеровирус;
  • токсоплазмоз;
  • возбудители краснухи, коклюша, листериоза;
  • кисломолочные грибы (урогенитальный кандидоз);
  • уреаплазма;
  • микоплазма;
  • хламидии;
  • вирус папилломы человека;
  • возбудитель инфекционного мононуклеоза.

Как подготовиться к сдаче мазка на ПЦР

Врач, назначая день сдачи мазка на ПЦР, учитывает день менструального цикла пациентки. Оптимально сдавать мазок накануне месячных или через 3 — 4 дня после их окончания. Мазок на ПЦР исключается брать в период кровянистых выделений, включая менструальные и дни и время ациклического кровотечения, иначе в соскоб попадет кровь, что затруднит проведение анализа или сделает его выполнение невозможным (поскольку анализ методом ПЦР платный — деньги пропадут). Несмотря на то, что процедура забора мазка из половых путей проста, врачи рекомендуют соблюсти ряд мер перед сдачей анализа:

  • отказаться от использования вагинальных суппозиториев, тампонов, таблеток за 3 дня до сдачи мазка;
  • пролечиться по поводу обильных влагалищных белей и только после лечения сдавать мазок;
  • отказаться от половых контактов за 3 суток до забора биоматериала;
  • воздержаться от применения средств интимной гигиены накануне и в день взятия мазка (подмываться чистой водой);
  • отказаться от спринцеваний за день до сдачи мазка.

Также необходимо учитывать следующее: при проведении антибиотикотерапии (по любому поводу) мазок из половых путей берется через 3 недели после окончания лечения. Перед забором мазка нет нужды соблюдать какие-либо ограничения по питанию и физической активности.

Процедура взятия мазка

Забор биоматериала у женщин на скрытые половые инфекции производится из трех точек: мочеиспускательного канала, канала цервикса и влагалищных стенок. Как правило, производится взятие мазка из цервикального канала. Схема последовательных действий:

  • пациентка укладывается на гинекологическое кресло;
  • врач в стерильных перчатках производит осмотр наружных половых органов, вводит во влагалище гинекологическое зеркало и удаляет слизь с наружного зева и из влагалища ватным тампоном;
  • забор мазка из цервикального канала производится специальной одноразовой щеточкой, которая соскабливает эпителий;
  • полученный материал вместе со щеточкой помещают в стерильную пробирку, плотно укупоривают ее и отправляют в лабораторию.

Взятие материала из шеечного канала и стенок влагалища является безболезненной процедурой, но в некоторых случаях женщина испытывает легкий дискомфорт и раздражение в ходе процедуры.

Получение результатов и их расшифровка

В большинстве случаев результаты анализа мазка методом ПЦР можно получить уже на следующий день. По показаниям возможно получение результатов в день исследования пациентки. Расшифровка анализа не составляет трудностей. Если возбудитель предполагаемой инфекции отсутствует, то в анализе ставится прочерк (отрицательный результат). При обнаружении ДНК/РНК тех или иных инфекционных агентов в биоматериале напротив перечисленных инфекций ставятся плюсы (положительный результат). Обнаружение скрытой половой инфекции требует назначения лечения женщине и ее постоянному половому партнеру. После окончания лечения (спустя 3 недели) производится новый забор биоматериала (контроль эффективности противовоспалительной и антибактериальной терапии).

Показания для сдачи мазка на ПЦР из половых путей

Сдача мазка на скрытые половые инфекции методом ПЦР показано в случае:

  • наличия признаков воспаления в мочеполовом тракте;
  • незащищенного полового акта со случайным партнером;
  • наличия трех и более половых партнеров в течение года;
  • бесплодия;
  • планирования беременности;
  • проведения ЭКО и других методик ВРТ;
  • планирования операции на половых органах.

Что выявляет мазок на ПЦР

Исследование биоматериала из половых путей методом ПЦР выявляет:

  • гонококков;
  • трихомонад;
  • хламидии;
  • герпетическую инфекцию;
  • микоплазмы и уреаплазмы;
  • вирус папилломы человека;
  • гарднереллы;
  • грибы.

Обычно производится исследование на весь спектр перечисленных инфекций. У большинства пациенток определяется две или более инфекции.

Видео: ПЦР анализ на инфекции. Зачем сдавать? Как подготовиться? Как сдать?

Внимание! Данная статья размещена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких обстоятельствах не является научным материалом или медицинским советом и не может служить заменой очной консультации с профессиональным врачом. За диагностикой, постановкой диагноза и назначением лечения обращайтесь к квалифицированным врачам!

Количество прочтений: 493 Дата публикации: 29.01.2020 Автор статьи:
Созинова Анна Владимировна

Акушер-гинеколог / Стаж: 19 лет

Над статьей работали:
Дудина Юлия Александровна

Главный редактор

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *