Анализ ана, что это?

Антитела к ядерным антигенам (ANA), скрининг

Антитела к ядерным антигенам (ANA) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Они являются маркером аутоиммунных заболеваний и определяются для их диагностики, оценки активности и контроля за их лечением.

В рамках исследования определяются антитела классов IgG, IgA, IgM.

Синонимы русские

Антиядерные антитела, антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор, АНФ.

Синонимы английские

Antinuclear Antibody, ANA, Fluorescent Antinuclear Antibody, FANA, Antinuclear factor, ANF.

Метод исследования

Иммунохемилюминесцентный анализ.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Антитела к ядерным антигенам (ANA) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Они выявляются в крови пациентов с разнообразными аутоиммунными заболеваниями, такими как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный панкреатит и первичный билиарный цирроз, а также с некоторыми злокачественными новообразованиями. Исследование ANA используется в качестве скрининга аутоиммунных заболеваний у пациента с клиническими признаками аутоиммунного процесса (длительная лихорадка неясного генеза, суставной синдром, кожные высыпания, слабость и др.). Такие пациенты при положительном результате анализа нуждаются в дальнейшем лабораторном обследовании, включающем более специфичные для каждого аутоиммунного заболевания тесты (например, анти-Scl-70 при подозрении на системную склеродермию, антитела к митохондриям при подозрении на первичный билиарный цирроз). Следует отметить, что отрицательный результат исследования ANA не исключает наличия аутоиммунного заболевания.

ANA наиболее характерны для пациентов с системной красной волчанкой (СКВ). Они обнаруживаются у 98 % больных ею, что позволяет считать это исследование основным тестом для диагностики СКВ. Высокая чувствительность ANA в отношении СКВ означает, что повторные отрицательные результаты делают диагноз «СКВ» сомнительным. При этом отсутствие ANA полностью не исключает заболевания. У небольшой части больных ANA отсутствуют на момент появления симптомов СКВ, но возникают в течение первого года болезни. У 2 % больных антитела к ядерным антигенам не выявляются никогда. При отрицательном результате анализа у пациента с симптомами СКВ целесообразно провести более специфичные для СКВ лабораторные тесты, в первую очередь на антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA). Выявление анти-dsDNA у пациента с клиническими признаками СКВ трактуется в пользу диагноза «СКВ» даже при отсутствии ANA.

СКВ возникает в результате комплекса иммунологических нарушений, развивающихся в течение длительного времени. Степень дисбаланса иммунной системы с течением болезни постепенно нарастает, что находит свое отражение в увеличении спектра аутоантител. Первый этап аутоиммунного процесса характеризуется наличием генетических особенностей иммунного ответа (например, определенных аллелей главного комплекса гистосовместимости, HLA) при отсутствии отклонений лабораторных исследований. На втором этапе в крови удается выявить аутоантитела, при этом клинических признаков СКВ нет. Антитела к ядерным антигенам, а также анти-Ro-, анти-La-, антифосфолипидные антитела наиболее часто выявляются на этом этапе. Обнаружение ANA ассоциировано с 40-кратным увеличением риска СКВ. Период между появлением ANA и развитием клинических симптомов бывает разным и составляет в среднем 3,3 года. Пациенты с положительным результатом анализа на ANA относятся к группе риска по развитию СКВ и нуждаются в периодическом наблюдении у ревматолога и в лабораторном обследовании. Третий этап аутоиммунного процесса характеризуется появлением симптомов болезни, при этом в крови удается обнаружить наиболее широкий спектр аутоантител, включая анти-Sm-антитела, антитела к двухцепочечной ДНК и рибонуклеопротеину. Таким образом, для получения полной информации о степени иммунологических нарушений при СКВ тест на ANA необходимо дополнять анализом на другие аутоантитела.

Течение СКВ варьируется от стойкой ремиссии до фульминантного люпус-нефрита. Чтобы дать прогноз заболевания, оценить его активность и эффективность лечения, используют различные клинические и лабораторные критерии. Так как ни один из тестов не позволяет однозначно предсказать обострение или поражение внутренних органов, мониторинг СКВ – это всегда комплексная оценка, включающая исследование ANA, а также других аутоантител и некоторых общеклинических показателей. На практике врач самостоятельно определяет набор тестов, наиболее точно отражающих, как изменяется течение заболевания у каждого пациента.

Особый клинический синдром представляет лекарственная волчанка. Она развивается на фоне приема некоторых лекарственных препаратов (чаще всего прокаинамида, гидралазина, некоторых ингибиторов АПФ и бета-блокаторов, изониазида, миноциклина, сульфасалазина, гидрохлортиазида и др.) и характеризуется симптомами, напоминающими СКВ. В крови большинства пациентов с лекарственной волчанкой также удается выявить ANA. При симптомах аутоиммунного процесса у пациента, принимающего эти препараты, рекомендуется анализ на ANA, чтобы исключить лекарственную волчанку. Особенность лекарственной волчанки заключается в исчезновении иммунологических нарушений и симптомов болезни после полной отмены препарата – в это время рекомендуется контрольное исследование ANA, и отрицательный результат подтверждает диагноз «лекарственная волчанка».

ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (в группе пациентов старше 65 лет эта цифра может достигать 10-37 %). Положительный результат у пациента без симптомов аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, клинических и лабораторных данных.

Для чего используется исследование?

  • Для скрининга аутоиммунных заболеваний, таких как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз и др.
  • Для диагностики системной красной волчанки, оценки ее активности, составления прогноза и контроля за ее лечением.
  • Для диагностики лекарственной волчанки.

Когда назначается исследование?

  • При симптомах аутоиммунного процесса: длительной лихорадке неясного генеза, болях в суставах, кожной сыпи, немотивированной утомляемости и др.

  • При симптомах системной красной волчанки (лихорадка, поражения кожи), артралгий/артрита, пневмонита, перикардита, эпилепсии, поражения почек.

  • Каждые 6 месяцев или чаще при обследовании пациента с диагнозом «СКВ».

  • При назначении прокаинамида, дизопирамида, пропафенона, гидралазина и других лекарственных препаратов, ассоциированных с развитием лекарственной волчанки.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

  • системная красная волчанка;
  • аутоиммунный панкреатит;
  • аутоиммунные заболевания щитовидной железы;
  • злокачественные новообразования печени и легких;
  • полимиозит/дерматомиозит;
  • аутоиммунный гепатит;
  • смешанное заболевание соединительной ткани;
  • миастения;
  • диффузный интерстициальный фиброз;
  • синдром Рейно;
  • ревматоидный артрит;
  • системная склеродермия;
  • синдром Шегрена;
  • прием таких лекарств, как прокаинамид, дизопирамид, пропафенон, некоторые ингибиторы АПФ, бета-блокаторы, гидралазин, пропилтиоурацил, хлорпромазин, литий, карбамазепин, фенитоин, изониазид, миноциклин, гидрохлортиазид, ловастатин, симвастатин.

Причины отрицательного результата:

  • норма.

Что может влиять на результат?

  • Уремия может приводить к ложноотрицательному результату.
  • Многие лекарственные препараты ассоциированы с развитием лекарственной волчанки и появлением ANA в крови.



Важные замечания

  • Отрицательный результат у пациента с признаками аутоиммунного процесса не исключает наличия аутоиммунного заболевания.
  • ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (10-37 % в возрасте старше 65 лет).
  • Положительный результат у пациента без симптомов аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, клинических и лабораторных данных (риск СКВ у таких пациентов увеличен в 40 раз).

Также рекомендуется

  • Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
  • Лейкоцитарная формула
  • Общий анализ мочи с микроскопией осадка
  • Креатинин в сыворотке
  • Альбумин в сыворотке
  • С3 компонент комплемента
  • Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
  • Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
  • Билирубин общий
  • Скрининг болезней соединительной ткани
  • Антитела к экстрагируемому ядерному антигену (ENA-скрин)
  • Антинуклеарные антитела, IgG (анти-Sm, RNP/Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, dsDNA, CENT-B, Jo-1, к гистонам, к нуклеосомам, Ribo P, AMA-M2), иммуноблот
  • Антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA), скрининг
  • Диагностика системной красной волчанки
  • Антифосфолипидные антитела IgG
  • Антифосфолипидные антитела IgM
  • Диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС)

Кто назначает исследование?

Ревматолог, дерматовенеролог, нефролог, педиатр, врач общей практики.

Литература

Анализ на антинуклеарные антитела

Что такое антинуклеарные антитела

Свечение антител в микроскопе

Антинуклеарные антитела — это патологические компоненты иммунной системы, ведущие к возникновению аутоиммунных заболеваний соединительной ткани, таких как системная красная волчанка, синдром и болезнь Шегрена, системная склеродермия.

Антинуклеарные антитела представляют из себя белки-иммуноглобулины, вырабатываемые защитными клетками человеческого тела (лимфоцитами). Из-за сбоя в работе иммунной системы ядра собственных клеток распознаются ею как чужеродные и вредные, что приводит к ошибочной выработке антител к разным компонентам клеточных ядер.

Всего выявлено более 190 компонентов ядра, к которым может вырабатываться патологический иммунный ответ, однако диагностическое значение имеют около 20 из них. К наиболее важным относят антитела к одно- и двуспиральной ДНК, гистонам, нуклеосомам и рибосомальному P-протеину.

Ядро содержится практически в любой клетке человеческого тела, за исключением некоторых кровяных. Оно находится внутри клетки и защищено собственной оболочкой, цитозолем и внешней клеточной мембраной. Антитела находятся во внеклеточной среде и чаще всего не могут напрямую контактировать с ядром, повреждая его. Однако при любом нарушении целостности клеточных оболочек антинуклеарные антитела, если они имеются в организме, способны связываться с компонентами ядра, образуя нерастворимые комплексы. Именно они и являются причиной возникновения разнообразных аутоиммунных заболеваний соединительной ткани.

Механизм образования

Антинуклеарные антитела и рецепторы

В норме собственные клетки организма даже в разрушенном состоянии иммунного ответа не вызывают. Однако сбои в работе иммунной системы наблюдаются постоянно даже у здоровых лиц, и при неблагоприятном стечении обстоятельств иммунитет может сформироваться на любой из компонентов клетки. В организме предусмотрена своеобразная система «отбраковки» патологических антител, в большинстве случаев она срабатывает, антитела уничтожаются, не вызывая болезнь.

Однако в некоторых случаях антинуклеарные антитела возникают в больших количествах и оказываются вовремя не распознаны организмом как патологические. Чаще всего это бывает при обширных солнечных ожогах, когда миллионы клеток кожи оказываются повреждены ультрафиолетом. Ядра погибших клеток оказываются непосредственно во внутренней межклеточной среде организма, где их встречают иммунные клетки — лимфоциты и макрофаги.

ДНК из ядер, гистоновые белки и другие белковые и нуклеиновые компоненты могут быть настолько повреждены ультрафиолетовым излучением, что в некоторых случаях изменяются до неузнаваемости. Именно это и провоцирует иммунные клетки вырабатывать против них антитела, как против чужеродных веществ.

Нормальные значения АНА

Отсутствие антител — вариант нормы

Нормальным значением является полное отсутствие антинуклеарных антител. При скрининговом ИФА-исследовании отрицательный ответ чаще всего записывается с указанием титра (разведения), пример: «Отрицательно, < 1:160». При развернутом иммуноблот-исследовании на антитела к разным компонентам ядра клетки, ответ зачастую записывается для каждого вида антител по отдельности. Например: «АТ к двуспиральной ДНК — отрицательно; АТ к PCNA — отрицательно; АТ к Scl-70 – отрицательно».

Иногда у здоровых лиц обнаруживаются AHA в небольших количествах (слабоположительный результат), что может свидетельствовать о генетической предрасположенности к аутоиммунным заболеваниям. Результат анализа «Сомнительно» может быть вызван наличием антител в очень низкой концентрации, которая находится около пороговых значений чувствительности медицинской тест-системы для анализа. Чаще всего после получения результата «Сомнительно» анализ рекомендуется повторить через 4-5 недель.

Причины повышения ANA

Повышение антител при системной склеродермии

Положительный результат анализа может свидетельствовать о наличии одного или нескольких следующих заболеваний:

  • системная красная волчанка,
  • лекарственная волчанка,
  • синдром или болезнь Шегрена,
  • системная склеродермия,
  • синдром Шарпа.

Гепатит может стать причиной слабоположительного результата

Слабоположительный результат может быть вызван как наличием вышеперечисленных заболеваний, так и заболеваниями, не связанными с системой иммунитета. Перечислим основные болезни, которые могут его вызвать:

  • ревматоидный артрит, в том числе ювенильный (детский),
  • первичная легочная гипертензия,
  • идиопатический легочной фиброз,
  • синдром Рейно (дигитальный васкулит),
  • болезнь Крона,
  • узелковый периартериит,
  • гепатиты различной природы,
  • злокачественные новообразования (опухоли),
  • некоторые инфекционные болезни (туберкулез, шистосомоз, малярия).

Слабоположительный результат анализа иногда выявляется у здоровых лиц, чаще у женщин в возрасте старше 60 лет.

Показания к исследованию

Показанием для проведения анализа могут быть боли в суставах

Исследование показано при симптомах, не исключающих аутоиммунную патологию соединительной ткани:

  • длительно сохраняющаяся повышенная температура тела;
  • беспричинное снижение массы тела;
  • уменьшение регионарных лимфатических узлов;
  • болезненность и скованность в суставах, когда не установлена иная причина патологии;
  • боли в мышцах;
  • кожная сыпь, особенно на лице в виде «красной бабочки» (нос и щеки рядом с крыльями носа);
  • перикардит и плеврит неясной причины;
  • изменения в общем и биохимическом анализе крови, когда исключены другие виды патологии.

Также анализ назначается при имеющемся аутоиммунном заболевании для контроля за эффективностью лекарственной терапии.

Подготовка к анализу и методика проведения исследования

Определение антител может быть выполнено в нескольких вариантах

Анализ сдается утром натощак либо в другое время, однако не ранее 5-6 часов после последнего приема пищи. Также желательно не принимать никакие лекарственные средства до взятия крови на исследование.

Существует несколько вариантов проведения анализа, отличающихся по своей точности и возможности количественной оценки концентрации антител.

Скрининговое ИФА-исследование (иммуноферментный анализ) позволяет выявить наличие суммарных антинуклеарных антител и их титра. К плюсам метода относится его относительная дешевизна и возможность выяснить, необходимы ли расширенные исследования. При отрицательном результате анализа дальнейшие исследования чаще не показаны.

Непрямая флуоресцентная микроскопия — это метод, основанный на окрашивании антител специальными веществами, дающими под ультрафиолетовым светом зеленое свечение. Тип и характер свечения позволяет врачу лабораторной диагностики определить, с какими компонентами клетки связались антитела, а также примерно узнать их количество.

Иммуноблот-исследование позволяет определить наличие каждого типа антинуклеарных антител по отдельности. Чаще всего этот анализ назначается после положительного результата другого исследования для уточнения диагноза.

Факторы, влияющие на результат

Лекарственные препараты способны искажать результат

Ложноположительный результат анализа может быть вызван приемом некоторых групп лекарственных препаратов:

  • антидепрессанты;
  • антиаритмики (бисопролол, биосотал);
  • противосудорожные препараты (карбамазепин, фенитоин);
  • препараты для лечения атеросклероза (ловастатин, аторвастатин);
  • средства для понижения артериального давления.

Прием лекарственных средств желательно ограничить за 1-2 дня до анализа в строгом соответствии с рекомендациями лечащего врача.

Лечение отклонений от нормы

Диагноз и лечение определяет врач

Для лечения аутоиммунных заболеваний соединительной ткани применяются следующие группы препаратов:

  • кортикостероиды (позволяют уменьшить иммунный ответ организма и снизить концентрацию патологических антител);
  • антифиброзные препараты (уменьшаю явления склерозирования соединительной ткани);
  • иммуносупрессивные средства;
  • ангиопротекторы (препараты, защищающие сосуды);
  • нестероидные противовоспалительные средства.

Стоит заметить, что диагностика данной группы заболеваний сложна и требует ряда дополнительных исследований, кроме выявления антинуклеарных антител и их вида. Диагноз чаще всего не может быть установлен после однократного исследования крови.

Анализ на антиядерные антитела — часть длительного процесса диагностики системных заболеваний соединительной ткани. При этом сложны и тесты и и их расшифровка.

ANA-скрининг

Какие типы антиядерных антител нужно проверять? Когда следует проводить тест?

Что такое ядерные антитела

Антинуклеарные антитела — это аутоантитела, направленные против компонентов собственных клеточных ядер, например, ДНК и цитоплазмы. Их изучают для выявления аутоиммунных заболеваний, так как они являются маркерами таких патологий.

Интерпретацию результатов анализов на антиядерные антитела затрудняет сложный механизм их образования. Наличие или отсутствие определенного антитела не всегда означает процесс заболевания.

Антиядерные антитела – типы

В медицине выделяется несколько типов аутоантител:

Антиядерные антитела – формирование и механизм действия

Аутоиммунитет — это неправильный ответ иммунной системы на собственные ткани, что приводит к появлению аутоиммунных заболеваний.

Описаны различные механизмы аутоиммунитета, один из которых связан с высвобождением антигенов, скрытых от иммунной системы, например, в результате повреждения воспалительной ткани. В итоге высвобождаются элементы, обнаруженные в ядре клетки, например, ДНК, РНК, гистоны, которые иммунная система начинает распознавать как нечто чужеродное и вырабатывать против них антиядерные антитела.

Патогенез аутоиммунитета

Антиядерные антитела – показания к анализам

Анализы на антиядерные антитела назначаются при сомнительных диагнозах редких заболеваний. К ним, например, относятся: системные заболевания соединительных тканей, аутоиммунный панкреатит, билиарный цирроз, некоторые раковые опухоли.

  1. Скрининг ANA особенно рекомендуется при симптомах аутоиммунных заболеваний, включая красную волчанку:
  • длительная лихорадка с неизвестными причинами;
  • суставной синдром;
  • высыпания на коже;
  • постоянная слабость и др.
  1. При артралгии/артрите, пневмоните, перикардите, эпилепсии и поражениях почек.
  2. При подтвержденном диагнозе СКВ (2 раза в год).
  3. При приеме лекарств: прокаинамида, дизопирамида, пропафенона, гидралазина и т.п..

Артрит

Эпилепсия

При положительном ответе, пациента необходимо обследовать и далее, проводя более специфичные тесты. Например:

  • При симптомах системной склеродермии важно выявить анти-Scl-70.
  • Для подтверждения билиарного цирроза делают антитела к митохондриям. При этом отрицательный ответ ANA не исключает аутоиммунного заболевания.
  • При симптомах СКВ требуется сделать тест на антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA). Наличие анти-dsDNA в сочетании с клиническими признаками болезни подтверждает диагноз, даже при отрицательном ANA.

Конкретных показаний для этих сложных анализов довольно много:

  • Подозреваемые заболевания соединительной ткани:
    • системная красная волчанка (наличие антител у 95-100% пациентов; специфический маркер заболевания — антитела против дцДНК);
    • лекарственная волчанка (95-100% пациентов);
    • антифосфолипидный синдром (40-50% пациентов);
    • системный склероз (80-95% пациентов, особенно антитела против Scl70);
    • полимиозит и дерматомиозит (40-80% пациентов, особенно антитела против Jo1 и против Mi2);
    • синдром Шегрена (48-96% пациентов, особенно анти-Ro и анти-La антитела);
    • ревматоидный артрит (около 10% пациентов);
    • ювенильный идиопатический артрит (менее 10% пациентов);
    • синдром Рейно (20-60% пациентов);
    • фибромиалгия (15-25% пациентов);
    • смешанные заболевания соединительной ткани (95-100% пациентов);
  • Оценка активности заболевания и мониторинг эффективности лечения, например, антитела против дцДНК при системной красной волчанке;
  • Корреляция наличия антител с появлением специфических симптомов заболевания, например синдрома Шегрена, и наличия антител против Ro и против La;
  • Прогнозирование рисков заболеваемости.

Синдром Шегрена

Как проводится анализ на антиядерные антитела

Для выявления антиядерных антител берется кровь из вены на локтевом сгибе.

Методы, используемые для определения антител, очень разные и зависят от типа измеряемого антиядерного антитела.

Это в первую очередь иммунологические методы, такие как:

  • ELISA;
  • РИА;
  • непрямая иммунофлюоресценция;
  • метод двойной иммунодиффузии;
  • вестерн-блот.

Для выявления антиядерных антител используется двухэтапная диагностика. Сначала проводится скрининг-тест с использованием метода непрямой иммунофлюоресценции, характеризующегося высокой чувствительностью.

Методика заключается в иммобилизации на микроскопном предметном стекле клеток линии HEp-2, полученных из эпителиальных клеток человека. Клетки этой линии имеют в своей цитоплазме и в ядре антигены, связывающие патологические антитела из крови пациента.

После добавления сыворотки пациента на предметное стекло антиядерные антитела связываются со специфическими антигенами и видны под микроскопом благодаря специальным флуоресцентным маркерам.

Преимущество непрямой иммунофлуоресценции заключается в способности дифференцировать типы антител на основе типа флуоресцентного красителя. Например, светящееся гомогенное клеточное ядро ​​означает наличие антител против dsDNA или антител против ssDNA.

Положительный результат скрининг-теста должен быть подтвержден. Для этой цели используются очень специфические иммунологические методы, например вестерн-блот. После обнаружения присутствия и идентификации типа антиядерного антитела определяют его титр, то есть концентрацию сыворотки, при которой можно определить присутствие антител.

Антиядерные антитела – как интерпретировать результат?

Нормальные титры антиядерных антител должны быть ниже 1:40. Если результат скрининг-теста нотрицательный и отсутствуют клинические симптомы, указывающие на заболевание соединительной ткани, диагноз не распространяется на конкретные антитела, например, анти-дцДНК, анти-Sm.

Клинически значимыми титрами у взрослых считаются ≥ 1: 160, а у детей ≥ 1:40.

В случае положительных результатов предлагается интерпретировать результат анализа следующим образом:

  • Титр 1: 40-1: 80 – пограничный (слегка положительный). При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани повторять тест или проводить контрольный тест не рекомендуется, так как результаты у большинства людей не меняются с годами.
  • Титр 1: 160-1: 640 – средне положительный. При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани рекомендуется повторить анализ через 6 месяцев.
  • Титр ≥ 1: 1280 – высоко положительный. При наличии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани для диагностики заболевания требуется дополнительная специализированная диагностика.

Следует иметь в виду, что серологические тесты на антиядерные антитела являются частью сложного диагностического процесса, и положительный результат всегда следует интерпретировать в контексте клинической картины и появления характерных симптомов заболевания.

Антиядерные антитела с низким титром встречаются у 5% людей из здоровой популяции, и их частота увеличивается с возрастом. В 65 лет — до 37 %. Положительный ответ без симптомов необходимо подтверждать, учитывая дополнительные анамнестические, клинические и лабораторные результаты.

Кроме того, их присутствие обнаруживается при физиологических и патофизиологических состояниях, но в этих случаях антиядерные антитела не имеют диагностического значения.

В эту группу входят:

  • инфекции, например, туберкулез, сифилис, малярия;
  • заболевания печени, например, цирроз печени;
  • заболевания легких, например саркоидоз, асбестоз;
  • раковые заболевания, например лейкоз, лимфома, рак молочной железы, меланома;
  • кожные заболевания, например псориаз, красный плоский лишай;
  • состояния после трансплантации органов, например, после пересадка сердца, пересадки почки;
  • использование лекарственных средств, например противоэпилептических препаратов, гидралазина, солей лития;
  • другие аутоиммунные заболевания, например. тиреоидит Хашимото, болезнь Аддисона, диабет типа I;
  • беременность (до 20% беременных).

Лейкоз

Псориаз

Появление различных типов антиядерных антител характеризуется этнической изменчивостью. Например, у людей с кавказским системным склерозом анти-АСА антитела встречаются чаще, а у афроамериканцев и жителей Африки чаще выявляются реактивные антитела к топоизомеразе.

Что может повлиять на результат?

Ложноотрицательные результаты дают уремия и прием лекарств, ассоциированных с развитием лекарственной волчанки.

Записаться Задать вопрос

Антинуклеарные антитела, иммуноблот (аутоантитела класса IgG к 14 различным антигенам: nRNP/Sm, Sm, SS-A (SS-A нативный и Ro-52), SS-B, Scl-70, Jo-1, PM-Scl, протеин B центромера, PCNA, dsDNA, нуклеосомы, гистоны, рибосомальный белок P, AMA-M2)

Антинуклеарные антитела, иммуноблот — показатель аутоиммунных заболеваний соединительной ткани.
При иммуноблоте определяются следующие антитела, являющиеся основными маркёрами аутоиммунных заболеваний соединительной ткани:

  • Аутоантитела IgG к антигену nRNP/Sm;
  • Аутоантитела IgG к антигену Sm;
  • Аутоантитела IgG к антигену SS-A (60 kДа);
  • Аутоантитела IgG к антигену SS-A (52 kДа);
  • Аутоантитела IgG к антигену SS-B;
  • Аутоантитела IgG к антигену Scl-70;
  • Аутоантитела IgG к антигену PM-Scl;
  • Аутоантитела IgG к антигену CENT B;
  • Аутоантитела IgG к антигену Jo-1;
  • Аутоантитела IgG к антигену ANA-PCNA;
  • Аутоантитела IgG к антигену dsDNA;
  • Аутоантитела IgG к нуклеосомам;
  • Аутоантитела IgG к гистонам;
  • Аутоантитела IgG к рибосомальному белку P;
  • Аутоантитела IgG к AMA-M2.

Антинуклерные антитела
Антинуклерные антитела представляют семейство аутоантител, связывающихся с рибонуклеиновыми кислотами и ассоциированными с ними белками. Они встречаются более чем у 90% больных с диффузными болезнями соединительной ткани, а также часто отмечаются при аутоиммунных заболеваниях печени и ряде других состояний. На сегодняшний день охарактеризованы около 200 разновидностей этого семейства аутоантител, но не все они могут быть использованы в клинической практике.

Иммуноблот антинуклеарных антител
Иммуноблот антинуклеарных антител позволяет в одном тесте одновременно провести исследование 15 основных разновидностей антинуклеарных антител, что обеспечивает проведение дифференциальной диагностики основных системных ревматических заболеваний. Каждая разновидность аутоантител, выявляемая с помощью иммуноблота, обычно отмечается у пациентов с характерной клинической картиной, поэтому спектр аутоантител позволяет не только диагностировать заболевание, но и установить риск развития определенных клинических проявлений.
Иммуноблот антинуклеарных антител необходимо использовать на втором этапе серологического обследования при положительном результате других тестов, указывающих на присутствие в сыворотке обследуемого антинуклеарных антител.
Метод иммуноблота антинуклеарных антител в диагностике системных ревматических заболеваний характеризуется высокой клинической специфичностью. Отрицательный результат иммуноблота в этом случае не исключает диагноза системных ревматических заболеваний.
Основные заболевания, связанные с выявлением антинуклеарных антител (антигены выявляемые при иммуноблоте) :

  • Sm (Smith). Специфический маркёр системной красной волчанки (входит в 10-й критерий СКВ Американского колледжа ревматологов, АСR);
  • SS-A (Ro52). Отмечается при различных аутоиммунных заболеваниях, чаще при системной красной волчанке и ее кожных формах, системных ревматических заболеваниях, ревматоидном артрите, аутоиммунных заболеваниях печени и т.д.;
  • SS-A (Ro60). Системная красная волчанка, кожные формы красной волчанки, фоточувствительность при системной красной волчанке, высокий риск врожденной красной волчанки и поражения сердца плода. Основной серологический показатель при синдроме Шегрена. Нередко отмечается совместно с антителами к SS-A (Ro52) антигену;
  • SS-B. Синдром Шегрена, системная красная волчанка;
  • PCNA. Системная красная волчанка, риск волчаночного нефрита;
  • Рибосомы (Ribo P). Системная красная волчанка, риск поражения центральной нервной системы.
  • Нуклеосомы. Системная красная волчанка, высокий риск волчаночного гломерулонефрита;
  • Двуспиральная. ДНК Специфический маркер системной красной волчанки (входит в 10-й критерий СКВ ACR), высокий риск волчаночного нефрита;
  • snRNP/Sm Смешанное заболевание соединительной ткани, системная красная волчанка с низким риском поражения почек, склеродермия;
  • Гистоны. Системная красная волчанка, лекарственная волчанка, склеродермия;
  • Scl-70. Системный склероз с диффузным поражением кожи и внутренних органов;
  • PM-Scl. Cклеродермия, сопровождающаяся полимиозитом;
  • CENР-B. CREST-синдром со склеродактилией, телангиэктазиями, подкожными кальцинатами, синдромом Рейно, эзофагитом;
  • Jo-1. Полимиозит в виде антисинтетазного синдрома;
  • AMA-M2. Первичный билиарный цирроз, синдром Шегрена.

Показания
Тест показан для диагностики и дифференциальной диагностики следующих состояний:

  • системная красная волчанка;
  • подострая кожная волчанка и другие разновидности кожной волчанки;
  • смешанное заболевание соединительной ткани;
  • синдром Шегрена и ассоциированные заболевания;
  • диффузная и локализованная склеродермия, CREST-синдром;
  • воспалительные миопатии (полимиозит и дерматомиозит);
  • ювенильный хронический артрит;
  • аутоиммунный гепатит;
  • первичный билиарный цирроз и склерозирующий холангит;
  • использование данного теста показано при обнаружении высоких титров антинуклеарного фактора, антинуклеарных антител, антител к экстрагируемому ядерному антигену, антител к ДНК, антител к нуклеосомам и антифосфолипидных антител.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак или спустя 4–6 часов после последнего приема пищи. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.
Интерпретация результатов
Единицы измерения: качественный тест, результат представляют в форме «обнаружено» или «не обнаружено».
При обнаружении полосы, характеризующей наличие какого-либо вида антител, интенсивность окраски полосы дополнительно описывают количеством плюсов («крестов») для каждого из выявленных видов антител. Увеличение степени позитивности косвенно отражает содержание и аффинность аутоантител.
Референсные значения: антитела к Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kДа), SS-A (52 кДа), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENР-B, dsDNA, Histone, Nucleosome, Rib P, AMA-M2, Jo-1 не обнаружены.
Результат определения аутоантител представляется в «крестах» для каждого соответствующего антигена. Увеличение степени серопозитивности косвенно отражает содержание и аффинность аутоантител.
Варианты результата оценки серопозитивности приведены ниже:

  • отрицательный — антитела к соответствующим белкам не обнаружены;
  • «+» — сомнительный (низкое содержание аутоантител к специфическому антигену);
  • «++» — положительный (среднее содержание аутоантител к специфическому антигену);
  • «+++» — сильноположительный (высокое содержание аутоантител к специфическому антигену). Часты случаи обнаружения в одном биоматериале нескольких специфичностей антинуклеарных антител.

Антинуклеарные антитела

Антинуклеарные антитела — общее название группы антител направленных против различных компонентов клетки, появление их связано с аутоиммунными заболеваниями, преимущественно системной красной волчанкой.

Синонимы: антиядерные антитела, антинуклеарный фактор, антиядерный фактор, антитела к экстрагируемым ядерным (нуклеарным) антигенам, antinuclear antibodies, Hep-2 substrate, ANA-Hep2, fluorescent antinuclear antibody detection, ANA, FANA

Антинуклеарные антитела — это

комплекс антител (более 200), преимущественно иммуноглобулины G (реже IgМ и IgА), появляются в результате нарушении механизма аутотолернатности при аутоиммунных и ревматических заболеваниях.

Иммунная система человека производит антитела — белки, которые борются с вирусами, бактериями, грибками, паразитами — т.е. всем, что генетически отличается от «своего». Задание любого антитела — уничтожить инородный материал, а родные клетки не трогать (механизм аутотолерантности)

В некоторых случаях иммунный ответ направлен не против чужих, а против собственных тканей. В таком случае говорят о аутоиммунном заболевании. А антитела, которые вырабатываются к своим же клеткам или их компонентам называются аутоиммунными.

У большинства людей есть в крови незначительное(!) количество аутоантител, которые не являются проявлением болезни.

Только в случае серьезной поломки в иммунитете, уровень аутоантител становится повышенным и достаточным для постановки диагноза.

ANA может быть положительным еще до появления первых симптомов болезни. Около 95 % пациентов с системной красной волчанкой имеют в крови антиядерные антитела. Наличие симптомов волчанки подтверждает диагноз.

  • воздействие ультрафиолетовых лучей на кожу приводит к активации запрограммированной гибели клетки (апоптоза), что является нормальной реакцией организма, но при системных заболеваниях одновременно массово мигрируют лимфоциты
  • ранее недоступные и невидимые для иммунной системы компоненты клетки, такие как ядрышки, гистоны, оболочка ядра и др. «оголяются», а макрофаги, вместо того, чтоб данный материал просто «утилизировать», передают сигнал о нем по цепочке иммунного ответа
  • В-лимфоциты, в ответ на сигнал макрофага, начинают вырабатывают антиядерные антитела, которые связываясь с соответствующим антигеном формируют иммунные комплексы (ядерный антиген + антитело IgG, IgM, IgA)
  • иммунные комплексы оседают на базальной мембране различных органов и тканей, особенно сосудов, активируют систему комплемента — местного воспалительного ответа
  • в итоге — повреждение и нарушение функции органа

Антинуклеарные антитела направлены против различных структур нормальной клетки.

Виды антинуклеарных антител:

  • anti-Ro (SS-A) — антитела к белкам связанным с РНК Y1-Y5 в сплайсосомах
  • anti-Jo1 — антитела к цитоплазматическому антигену Jo-1
  • anti-dsDNA — антитела к двухцепочечной ДНК
  • anti-Sm
  • anti-La (SS-B) — антитела к белку, связанному с РНК-полимеразой-3
  • anti-Sci 70 — антитела к ядерной топоизомеразе
  • anti-U1 RNP — антитела к U1 рибонуклеопротеину
  • антицентромерные антитела
  • антигистоновые антитела
  • диагностика системной красной волчанки, синдрома Шергена

Системная красная волчанка

Системная красная волчанка — аутоиммунное заболевание соединительной ткани и сосудов. Это наиболее тяжелое заболевание соединительной ткани, при котором отмечаются резкие боли в суставах, поражение кожи («бабочка»), серозных оболочек, сердца, почек, нервной системы, легких, трофические нарушения.

Симптомы

  • артрит — воспаление сустава, проявляться болью, отечностью, нарушением подвижности, покраснением кожи и повышением температуры над ним
  • воспаление внешней оболочки сердца или плевры (перикардит или плеврит) неясного происхождения
  • изменения в результатах анализа мочи (протеинурия, гематурия — белок или эритроциты в моче)
  • гемолитическая анемия — разрушение эритроцитов с повышением уровня билирубина в крови и моче
  • тромбоцитопения — сниженное число тромбоцитов в крови
  • нейтропения — сниженное число нейтрофилов в лейкоцитарной формуле
  • кожные симптомы — сыпь, утолщение кожи, особенно после активного воздействия солнца
  • синдром Рейно — периодическое изменение цвета пальцев стоп и кистей (бледность, посинение и покраснение) с нарушением чувствительности и болью
  • атипичные неврологические и психические симптомы
  • повышение температуры тела, усталость, снижение веса, увеличение лимфатических узлов

Методы

Существует два метода определения антинуклеарных антител в крови.

Непрямая иммунофлуоресцентная микроскопия

Непрямая иммунофлуоресцентная микроскопия (FANA — fluorescent antinuclear antibody test) на препарате Hep-2 клеток (клеточная линия, полученная из аденокарциномы гортани) — антинуклеарные антитела (при их наличии) связываются с антигенами клеток Hep-2, добавляют специальные светящиеся метки, присоединяющиеся к образованному комплексу и под микроскопом смотрят интенсивность и тип свечения. Лучший метод исследования антинуклеарных антител. Другое название — волчаночные тест-полоски.

Результат исследования пишут в виде титра — максимального разведения крови, при котором видно свечение, также описывается тип флуоресценции (в случае положительного результата). Чем больше антител, тем выше титр. Низкие титры считаются негативными, а высокие обозначают повышенную концентрацию антиядерных антител.

Типы флуоресценции при оценке ANA:

  • гомогенный (диффузный, однородный) — при системной красной волчанке, смешанных заболеваниях соединительной ткани (MCTD)
  • зернистый (гранулярный) — при системной красной волчанке, синдроме Шегрена, склеродермии, полимиозите, ревматоидном артрите и MCTD — самый неспецифический
  • ядрышковый (нуклеолярный) — при склеродермии и полимиозите
  • центромерный — при склеродермии и CREST синдроме
  • цитоплазматический — дерматомиозит, полимиозит, аутоиммунные заболевания печени, первичный билиарный цирроз

Пример положительного результата исследования антиядерных антител: «Положительный разведение/титр 1:320, гомогенная картина“.

Алгоритм действий врача после исследования антиядерных антител методом FANA

  • отрицательный результат анализа на антиядерные антитела + симптомы — провести анализы: anti-Ro и anti-Jo1
  • положительный результат анализа на антиядерные антитела + наличие/отсутствие симптомов — провести анализы на anti-DNA, anti-Sm, anti-Ro, антигистоновые и антицентромерные антитела, волчаночный антикоагулянт, anti-Sci-70, anti-U1 RNP, anti-Jo1 — зависит от проявлений заболевания

Ферментный иммунный анализ

Ферментный иммунный анализ (ELISA) — антитела, присутствующие в крови, связываются с соответствующим антигеном, что приводит к изменению цвета раствора.

  • менее 1.0 U — отрицательный результат (норма)
  • 1.1-2,9 U — слабо положительный (требует повторения)
  • 3,0-5,9 U — положительный
  • более 6,0 — резко положительный

Положительный результат анализа на антинуклеарные антитела — это не диагноз, а восклицательный знак о необходимости дополнительных исследований. Требует периодического, более тщательного обследования, для максимально раннего выявления возможного заболевания.

Отрицательный результат исследования на антинуклеарные антитела указывает на их отсутствие в крови, но не исключает диагноз аутоиммунного заболевания.

Норма

В норме в крови нет антиядерных антител.

Дополнительные исследования

  • общий анализ крови
  • общий анализ мочи
  • печеночные пробы — билирубин, АСТ, АЛТ, ГГТ, щелочная фосфатаза
  • ревмопробы — С-реактивный белок, скорость оседания эритроцитов (СОЭ), ревматоидный фактор
  • АЦЦП
  • анализ на LE-клетки
  • циркулирующие иммунные комплексы
  • С3 компонент комплемента
  • С4 компонент комплемента

Что влияет на результат?

  • лекарственные препараты — прокаинамид, фенитоин, пенициллин, гидралазин
  • ОРЗ и простуда, любое острое или хроническое инфекционное заболевание

Причины появления ANA

1. Системные заболевания соединительной ткани

2. Аутоимунные заболевания

  • аутоимунный тиреоидит (30-50%)
  • узелковый периартериит (15-25%)
  • сахарный диабет
  • миастения

3. Инфекционные заболевания — частота выявления антинуклеарных антител варьирует

  • острая ревматическая лихорадка
  • инфекционный мононуклеоз
  • острый вирусный гепатит В, гепатит С
  • хронический активный гепатит
  • малярия
  • лепра
  • туберкулез

4. Опухолевые заболевания

  • тимома
  • опухолевые заболевания крови — острый и хронический лейкоз, лимфомы

5. Другие заболевания

  • идиопатическая тромбоцитопения (30%)
  • рассеянный склероз (25%)
  • фибромиалгия (15-25%)
  • болезнь Рейно (20-60%)
  • приобретенная гемолитическая анемия
  • хроническая почечная недостаточность
  • цирроз печени
  • интерстициальный фиброз легких
  • первичный склерозирующий холангит
  • диффузный фасциит с эозинофилией
  • витилиго

При инфекционных, опухолевых заболеваниях появление антинуклеарных антител неустойчиво — при обострении есть, во время ремиссии исчезают.

Антинуклеарные антитела у здоровых

  • выявляются у 3-15% популяции
  • чаще у женщин и лиц старше 65 лет
  • с увеличением возраста титры антинуклеарных антител растут
  • антинуклерные антитела представлены преимущественно иммуноглобулинами М (IgM)
  • могут появится за несколько лет до первых симптомов системного заболевания

Частота выявления

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *